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PCR實操避坑分享
PCR實操避坑分享 發布時間:2025-09-28
前段時間和大家分享了PCR反應的過程控制,今天來聊聊PCR的操作手法。實操可以說是整個PCR實驗流程中最容易被忽略卻又至關重要的一環。下面小編就來分享一下自己當初的一些經驗心得,僅代表個人看法。先說體系配置(各組分分開,非預混液)。配置前先計算好所需要的各組分體積,統一配置好后再...
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    3-10
    迷你梯度PCR儀常用的五種分析方法
    迷你梯度PCR儀的梯度溫度控制是一項可有助于PCR中引物退火優化的功能。梯度設定的目的是在模塊之間實現變化的溫度,通過每列之間≥2°C的間隔溫度升降,使得可同時對于一系列的溫度進行測試以獲取引物退火溫度。該技術的一種形式便是設計帶有三個或更...
  • 2022

    3-1
    三槽梯度PCR儀科普知識大全,你真不一定都懂
    三槽梯度PCR儀溫度的準確性可能會對PCR的成敗與否起決定性作用,因為PCR的三個主要步驟都依賴于溫度。類似地,加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復的PCR結果也是至關重要的。因此,所使用的PCR儀能在模塊之間準確到達設定的...
  • 2022

    1-21
    雙槽梯度PCR儀應該這樣使用
    雙槽梯度PCR儀的反應原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火(復性)--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時聚合酶鏈式反應間后,使模板DN...
  • 2022

    1-17
    熒光定量基因擴增儀使用必須遵守下面的基本安全措施
    熒光定量基因擴增儀在操作、維護和修理本儀器的所有階段,都必須遵守下面的基本安全措施。如果不遵守這些措施或本說明書其它地方指出的警告,便可能影響到儀器提供的保護。同時,這也會破壞設計和制造的安全標準以及儀器的預期使用范圍。a)儀器接地為了避免...
  • 2022

    1-11
    熒光定量PCR的理論依據是什么?
    熒光定量PCR在反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化。從而得到一條熒光擴增曲線。熒光擴增曲線...
  • 2022

    1-4
    二維梯度PCR的應用領域有哪些?
    PCR技術從發明至今已有二十多年的時間,用于PCR實驗的儀器不斷的推陳出新。然而PCR的基本過程沒有太大變化,包括變性-退火-延伸這三步。這其中包括反應條件、使用試劑的量甚至是引物等,很多研究者在進行PCR優化時都會考慮退火溫度的優化,這時...
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